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常规组织样本核酸(DNA/RNA)提取纯化


QIAamp DNA Kits 
—— 纯化基因组 DNA、线粒体 DNA、**、寄生虫或病毒DNA

  1. 20 分钟内快速纯化高品质,高产量,即用型 DNA(见图 20)
  2. 多种规格可选择:Mini Kit 可处理 25 mg 组织,Micro Kit 可处理小于 10 mg 组织
  3. 完全去除污染物和抑制剂
  4. 可在 QIAcube 上进行自动化纯化

表1 QIAamp DNA Mini Kit纯化各类样本的核酸产量

样品

用量

总核酸的量(µg)*

DNA 的量(µg)†

血液

200 µl

4–12

4–12

白膜层

200 µl

25–50

25–50

细胞

106

20–30

15–20

肝脏

25 mg

60–115

10–30

大脑

25 mg

35–60

15–30

肺

25 mg

25–45

5–10

心脏

25 mg

15–40

5–10

肾脏

25 mg

40–85

15–30

脾脏

10 mg

25–45

5–30


* 核酸未经RNase处理 。
† 核酸经RNase处理。总核酸的量(µg)*


图1 纯化长达50 kb的基因组DNA
QIAamp Kits从图示来源的样本(每泳道3 µg)中纯化获得的DNA长度



RNeasy Kit —— 常规组织或细胞 RNA 纯化

  1. 从细胞、组织或酵母中纯化至总 RNA
  2. 数分钟内快速纯化得到高品质总 RNA
  3. 即用型 RNA 在各种下游应用中表现良好
  4. 无需有机试剂或乙醇沉淀步骤

RNeasy Kits 四种规格(Micro, Mini, Midi, Maxi),RNeasy 离心柱的结合能力分别为45 μg, 100 μg, 1 mg 和 6 mg 的 RNA。

表2 RNeasy Mini Kit从各类样本中纯化得到的总RNA产量

样本来源

起始材料

平均产量(µg)

动物细胞
LMH
HeLa
COS-7
**细胞(未受激)


1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106


12
15
35
0.5

小鼠组织
肝
肺
脾


10 mg
10 mg
10 mg


40
10
35

**细胞
S. cerevisiae


1 x 107


25


图2 从多种样本中纯化高品质RNA。


使用RNeasy Maxi Kit纯化的总RNA的甲醛琼脂糖凝胶电泳和northern印迹。从各种来源的样本中分离总RNA(10 µg)上样至各泳道。所有组织均来源于小鼠。酵母:Saccharomyces cerevisiae;E. coli菌株:HB101。32P标记的探针识别的(G)GAPDH;(E)翻译延长因子EF-1α;和(O)外膜蛋白A序列。(E和O分别由瑞士巴塞尔大学的P. Philippsen和德国蒂宾根马克斯-普朗克生物学研究所的U. Henning。)B. subtilis未采用探针检测。M:0.24–9.5 kb RNA分子量标准。胚胎、Huh7和HeLa细胞泳道中的7.5 kb条带(图示)为核前体RNA。

表3 常规组织,细胞核酸纯化产品列表:


产品名称

货号

QIAamp DNA Mini Kit (50)

51304

QIAamp DSP DNA Mini Kit (50)

61304

RNeasy Mini Kit (50)

74104

RNeasy Mini Kit (250)

74106

RNeasy Plus Mini Kit (50)

74134

RNeasy Plus Universal Midi Kit (10)

73442

RNeasy Midi Kit (10)

75142

RNeasy Midi Kit (50)

75144

RNeasy Maxi Kit (12)

75162

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