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分子杂交原理
分子杂交
(
简称杂交
,hybridization)
是核酸研究中一项基本的实验技术。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质
,
使来源不同的
DNA(
或
RNA)
片段
,
按碱基互补关系形成杂交双链分子
(heteroduplex)
。杂交双链可以在
DNA
与
DNA
链之间
,
也可在
RNA
与
DNA
链之间形成。核酸分子杂交是基因诊断的基本的方法之一。它的基本原理是:互补的
DNA
单链能够在一定条件下结合成双链,即能够进行杂交。这种结合是特异的,即严格按照碱基互补的原则进行,它不仅能在
DNA
和
DNA
之间进行,也能在
DNA
和
RNA
之间进行。因此,当用一段已知基因的核酸序列作出探针,与变性后的单链基因组
DNA
接触时,如果两者的碱基完全配对,它们即互补地结合成双链,从而表明被测基因组
DNA
中含有已知的基因序列。由此可见,进行基因检测有两个必要条件,一是必需的特异的
DNA
探针;二是必需的基因组
DNA
。当两者都变性呈单链状态时,就能进行分子杂交。
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